Při manipulaci s mikroorganismy je důležité správně používat aseptickou techniku-jak pro zamezení kontaminace vašich mikroorganismů vnějšími silami, tak pro ochranu sebe a lidí kolem vás.
Kroky
Krok 1. Chraňte se
Svažte dlouhé vlasy a noste laboratorní plášť a ochranné brýle.
Krok 2. Umyjte si ruce a pracovní prostor
Umyjte si ruce vodou a mýdlem a nastříkejte lavičku 70% ethanolem.
Krok 3. Rozložte veškeré vybavení
Před spuštěním se ujistěte, že máte vše připraveno.
Krok 4. Zapněte bunsen hořák tak vysoko, jak je to možné
Budete jej potřebovat ke sterilizaci vašeho vybavení a vzestupný tah brání vnikání nečistot zvenčí do vaší kultury.
Otočte límec tak, aby byl proud vzduchu zcela otevřený
Krok 5. Sterilizujte očkovací smyčku
Držte jej v úhlu zhruba 45 ° dolů a pomalu jím pohybujte plamenem, aby žhavě zářil červeno-bíle.
- Nejjednodušší je držet smyčku mezi palcem a ukazováčkem a podepřít ji prostředníčkem.
- Nejžhavější část plamene je přímo na špičce vnitřního modrého ohnivého kužele.
Krok 6. Druhou rukou uchopte svou původní kulturu
- Pokud se jedná o talíř, přidržte jej a otevřete víko natolik, aby se smyčka dostala dovnitř.
- Pokud se jedná o zkumavku s víkem, odstraňte víčko malíčkovým prstem ruky, kterou držíte očkovací smyčku, a poté dvakrát rychle přetáhněte otvor tuby plamenem bunsenového hořáku. Říká se tomu hoření a zabíjí vše, co se chce dostat do trubice, a vytváří konvekční proud, který vytlačuje vzduch z trubice, takže ji nic nemůže dostat. V dalším kroku se držte víčka s malíčkem.
Krok 7. Očkujte
Dotkněte se očkovací smyčky kolonie, kterou chcete sebrat. Pokud očkujete z tekutého vývaru, ponořte očkovací smyčku do zkumavky a smyčku protřepejte, abyste se ujistili, že máte dostatek bakterií.
Krok 8. Zavřete původní kulturu
Pokud je to talíř, zavřete víko a dejte ho zpět. Pokud se jedná o trubici, přetáhněte otvor plamenem bunsenového hořáku dvakrát a poté znovu nasaďte víko.
Krok 9. Otevřete novou desku
Stejně jako dříve otevřete volnou rukou víko dostatečně široké, aby se smyčka dostala dovnitř
Krok 10. Destička s bakteriemi
Očkovací smyčku lehce přejeďte po povrchu a dávejte pozor, abyste nepronikli do agaru.
Běžným vzorem pruhů je kvadrantová metoda
Krok 11. Uzavřete desku
Krok 12. Sterilizujte očkovací smyčku
Stejně jako dříve jej držte pod úhlem 45 ° dolů a pomalu jím pohybujte plamenem, aby se rozžhavil na červeno-bílou.
Tipy
- Rukavice obecně nejsou nutné. Všechny výše uvedené kroky slouží k ochraně vás i vašich bakterií, takže riziko kontaminace je velmi nízké. Rukavice mohou způsobit nepříjemné popáleniny, pokud se jich omylem dotknete horkou očkovací smyčkou.
- Mějte na paměti, že pracujete s ohněm. Není to nic velkého, jen se ujistěte, že víte, co dělat, když se spálíte; pozastavte experiment, opláchněte popáleninu vodou a v případě potřeby informujte svého nadřízeného.
- Pokud provádíte několik běhů, kdy musíte použít aseptickou techniku, není nutné bunsenový hořák mezi běhy úplně vypínat - stačí ho vypnout na pilotní plamen a úplně jej vypnout, až když jste úplně hotovi.
